血脂仪的血脂仪检测原理
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血脂仪的血脂仪检测原理
血脂包括多种指标，测定方法也因不同的指标而不同，最基本的包括总胆固醇、甘油三酯和血高密度胆固醇（HDL）l、总胆固醇（TC）酶法（COD-PAP法）原理：血清中的胆固醇约1/3为游离胆固醇，2/3为与脂肪酸结合的胆固醇酯。
胆固醇酯被胆固醇酯水解酶（CEH）水解成游离胆固醇，后者被胆固醇氧化酶（COD）氧化成胆甾烯酮并产生过氧化氢，再经过氧化物酶催化，使4-氨基安替比林与酚（三者合称PAP）反应，生成红色醌亚胺色素（Trinder反应）。
醌亚胺的最大光吸收在500nm左右，吸光度与标本中TC含量成正比。
正己烷抽提L-B反应显色法原理：用氢氧化钾乙醇液使血清蛋白变性，并使胆固醇酯水解为胆固醇。
加水后用正己烷分溶抽提，可从碱性乙醇中定量地提取胆固醇（达99.7%）。
提取的胆固醇溶液中除少量其它固醇（人血清中约含胆固醇的1%）以外，基本上不含干扰物。
故测定结果与同位素稀释-气相色谱质谱法（决定性方法）接近。
2、甘油三酯酶法（COD-PAP法）原理：用脂蛋白酯酶（LPL）使血清中三酰甘油（TG）水溶解成甘油与脂肪酸，将生成的甘油用甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP）磷酸化。
以磷酸甘油氧化酶（GOP）氧化3-磷酸甘油（G-3-P），然后以过氧化物酶（POD），4-氨基安替比林（4-APP）与4-氯酚（三者合称PAP）反应显色，测定所生成的H2O2，故本法简称为CPO-PAP法。
变色酸显色法（CDC参考方法）原理：用二氯甲烷提取血清TG，同时加入硅酸去除磷脂、游离甘油、甘油一酯、部分甘油二酯及蛋白。
TG经氢氧化钾皂化生成甘油，酸化后以过碘酸氧化甘油产生甲醛，用亚砷酸还原过剩的过碘酸后，甲醛与变色酸在硫酸溶液中加热产生紫红色反应，然后比色测定。
3、血高密度胆固醇（HDL）匀相测定法基本原理有以下几类：PEG修饰酶法（PEG法）、选择性抑制法（SPD法）、抗体法（AB法）、过氧化氢酶法（CAT法）超速离心结合选择性沉淀法美国CDC采用本法测定参考血清的靶值，并用于评价常规方法的准确性，被认为是目前测定HDL-C最准确的方法。
此法分三步：超速离心—选择性沉淀—HDL-C测定。
硫酸葡聚糖-Mg沉淀法原理：以硫酸葡聚糖DS50(MW±5000)与镁离子沉淀血清中含apoB的脂蛋白[LDL,VLDL,Lp(a)]，测定上清液中的HDL-C。
[2]4、血低密度胆固醇（LDL）匀相测定法基本原理有以下几类：增溶法（Sol法）、表面活性剂法（SUR法）、保护法（PRO法）β-定量法本法为超离心结合选择性沉淀法。
超离心、选择性沉淀二步骤与HDL-C参考方法相同，只是，Chol测定时除测定沉淀后上层的HDL-C外，还同时测定超离心后的下层液（含HDL和LDL）胆固醇。
PVS沉淀法原理：血清中聚乙烯硫酸盐-聚乙二醇甲醚（PVS）选择性地沉淀LDL，离心后上层液中含HDL,VLDL和CM，用胆固醇测定酶试剂分别测定上层液和血清总胆固醇含量，二者之差即LDL-C含量。
Friedawald公式计算法Friedawald原公式按旧单位mg/dl计算，假设血清中VLDL-C为血清TG量的1/5量计（以重量计）则：LDL-C=TC-HDL-C-TG/5。
按法定计量单位mmol/L计算，则应为LDL-C= TC-HDL-C-TG/2.2。
gop-pod法临床意义
生理性高血糖现象常见于摄入高糖食物或情绪紧张时，以及肾上腺分泌增加。
病理性高血糖主要包括糖尿病患者，他们可能因胰岛素绝对或相对不足而出现。
内分泌腺功能障碍，如甲状腺功能亢进、肾上腺皮质及髓质功能亢进，亦会刺激过多对抗胰岛素的激素分泌，导致高血糖。
此外，颅内压增高，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等，也会刺激血糖中枢，引起高血糖。
脱水，如呕吐、腹泻和高热等情况，也可能导致血糖轻度增高。
生理性低血糖通常发生在饥饿和剧烈运动后。
病理性低血糖类型多样，其中特发性功能性低血糖最为常见，其次为药源性、肝源性、胰岛素瘤等。
胰岛β细胞增生或胰岛β细胞瘤等疾病，可能因胰岛素分泌过多而导致低血糖。
对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退，可导致生长素、肾上腺皮质激素分泌减少，进一步引发低血糖。
严重肝病患者，由于肝脏储存糖原及糖异生功能低下，肝脏不能有效地调节血糖，也可能导致低血糖。
gop-pod法即葡萄糖氧化酶法，可以用来测测定血清（浆）葡萄糖。
葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
腺苷脱氨酶测试方法介绍
随着对腺苷脱氨酶(ADA)研究的深入，检测技术历经四代演变。
第一代检测法，由Kaplan法（1955年）建立，通过测量265nm处腺苷的吸光度下降速度，但因底物浓度低（40μM以下）可能导致失真，不适合临床使用。
第二代测试基于腺苷脱氨酶的显色反应，如Berthelot法，能测定氨生成量，但灵敏度低，易受外源性NH3干扰。
第三种方法是通过偶联GLDH反应测量NADPH吸光度，同样受血清氨和NADPH非特异性氧化的影响。
进入第三代，Kalckar氏采用连续监测法，通过尿酸盐的吸光度上升来测ADA，但293nm的血清吸光度过高，影响临床实用性。
而第四代，通过PNP、XOD、过氧化氢酶和醛脱氢酶的反应，测量NADPH吸光度上升，成本高，制约了其在临床中的应用。
最新的改进是将PNP、XOD与过氧化物酶反应结合，利用EHSPT和4-AA进行Trinder氏反应，测定有色醌在550nm处的吸光度上升。
这种方法具有高精密度、抗干扰性强，适用于自动化快速测定，为临床ADA检测提供了更好的条件。
腺苷脱氨酶（EC:3.5.4.4 adenosine deaminase ADA）是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制。
ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。
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